荧光是生物和分析显微镜中最常用的物理现象之一,主要是因为它具有灵敏度高、特异性强的特点。荧光是冷发光的一种形式。荧光显微镜甚至允许用户决定单个分子种类的分布、数量及其在细胞内的位置。可以实现共区域化和相互作用的研究,离子浓度以及观察细胞内间的胞吞和胞吐过程。借助超分辨率荧光显微镜,甚至可以成像亚分辨率结构。而在荧光分析中常用汞灯作激发光源,根据汞蒸气压的不同可分为以下几种:
一、低压汞灯:汞蒸气,可发射出很强波长的射线,寿命很长,可长时间连续工作,射线对眼睛有害,不眼睛时不可长时间注视。二、高压汞灯:高压汞灯又叫高强度紫外线灯,汞蒸气为1-数个大气压,可见炮区的谱线增强,在紫外光区,波长为365nm的光线最强。三、中压汞灯:可以发射一系列汞线组成的不连续光谱,除254nm波长以外,多数谱线都可作为校正波长使用。此外,还有超高压汞灯、汞-氙灯、汞-锌灯等。

四、氢洒和氘灯:是灯泡中加氢蒸气,经闭合放电产生160-350nm波长的光,氢朋激发态返回的基态时,就发射了氢的连续光谱,在160nm以下为线乐谱,氢灯和氘灯性能相同,其寿命也比氢灯长,因玻璃吸收紫外线,故灯壳要用石英制作,或在灯泡出光处开一石英窗,此光源适用于紫外光区的测定。五、氙灯:光的辐射能强度很高,它可在220-1100nm之间发射很强的连续光谱,可用于紫外区,可见光及近红外区的测定,虽其辐射范围广,使用中在生产高热的同晨有臭氧味,其寿命短,灯泡内压较大,如日立牌650-60型荧光分光光度计,氙灯平时约有7个大气压,点燃后可达30个大气压,故使用进应注意。

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